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公布日期:2018-01-23 17:00

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     不论是细胞医治仍是基因治疗都离不开病毒载体。今朝利用最多的病毒载体范例包罗:腺相干病毒(AAV)、慢病毒(Lv)、逆转录病毒(Rv)和腺病毒(Adv)等,这些常用病毒载体特性如下图所示:

特性
慢病毒
Lentivirus
逆转录病毒
Retrovirus
腺相干病毒
AAV
腺病毒
ADV
基因表达
稳转/瞬转
稳转 新葡京388
瞬转
瞬转
能否能传染可团结的细胞
能否能传染不团结的细胞
能否能整合到靶细胞基因组
靶细胞的免疫反响
较低
十分低
病毒滴度
+++
++
+++
++++
转染服从
+++
++
+++
++++



因而在挑选病毒载体时,除了要思索载体本身特性以外,如何包装并获得高滴度高活性的病毒载体对后续尝试至关重要,针对病毒载体制备5大环节,小美为您推荐以下解决方案↓

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1. 病毒载体包装质粒体系
西美杰代办署理的美国Cell Biolabs公司推出的病毒包装体系可满意多种重组病毒包装需求,包罗四大范例病毒包装质粒AAV Helper Free System、ViraSafe? Lentivirus Expression Complete Systems、Platinum Retroviral Expression Systems以及RAPAd? Adenoviral Expression Systems等。更多病毒包装质粒体系引见。


2. 病毒包装试剂

A. 病毒包装公用转染试剂
西美杰代办署理的美国Mirus公司新推出的病毒包装公用转染试剂TransIT?-VirusGEN?与TransIT?-Lenti系列,专门针对AAV和Lentivirus设想,比拟传统转染办法能得到更高的转染服从和病毒滴度,无植物源身分且兼容多种病毒包装体系及差别细胞系范例。

品名
货号
规格
合用病毒范例
TransIT?-VirusGEN? Transfection Reagent
MIR 6703
0.3/0.75/1.5mL 新葡京388
AAV & Lentivirus
TransIT?-Lenti Transfection Reagent
MIR 6603
0.3/0.75/1.5mL
Lentivirus


B. Lv/Rv包装服从加强剂Lentivirus/Retrovirus 10X Titer-Up
西美杰独家代理的101Bio品牌Lentivirus/Retrovirus 10X Titer-Up用于重组慢病毒或逆转录病毒包装历程,可增进病毒基因组转录和RNA不变,使转染服从提高10倍阁下。

品名
货号
规格
合用病毒范例
Lentivirus 10X Titer-Up
P906
1 mL
Lentivirus
Retrovirus 10X Titer-Up
P909
1 mL
Retrovirus


C. AAV/Adv病毒开释液Virus-High? AAV/ADV Release Solution
西美杰独家代理的101Bio品牌Virus-High? AAV/ADV Release Solution是一款无需重复冻融,便可从细胞中快速高效播种AAV/Adv病毒以及其他非排泄型无囊膜病毒的试剂。

品名
货号
规格
合用病毒范例
Virus-High? AAV / Adv Release Solution
P900
10 mL
AAV & Adv


3. 高效快速病毒稀释试剂与纯化试剂盒
西美杰独家代理的美国Cali-bio和Cell Biolabs品牌专门针对病毒载体设想的高效重组病毒稀释纯化试剂(盒),在得到重组病毒高回收率的同时大大简化操纵流程,无需超速离心装备,是中小范围样本纯化的首选计划。

重组病毒范例
品名
货号
特性
逆转录病毒
(Retrovirus)
Retrovirus Concentration Solution(5×)
逆转录病毒稀释试剂
CB300904
无需超速离心;
1小时内病毒稀释10-100倍;
稀释后病毒适用于各类细胞;
慢病毒
(Lentivirus)
Lentivirus Concentration Solution(5×)
慢病毒稀释试剂
CB300905
ViraBind? Lentivirus Purification Kit
VPK-104
操纵工夫< 2h,无需超速离心;
回收率>90%,纯化结果与CsCl办法相称
腺相干病毒
(AAV)
ViraBind? AAV Purification Kit
(合用样本量为2个10cm皿或1个15cm皿播种的上清)
VPK-140
适用于纯化AAV-2与AAV-DJ;
操纵工夫约3h;
ViraBind? AAV Purification Mega Kit
(一次处置样本量可达10个15cm皿播种的上清)
VPK-141
得到AAV纯度>95%,回收率>60%
腺病毒
(ADV)
ViraBind? Adenovirus Miniprep Kit
(合用样本量为1个T75瓶或1个10cm皿播种的上清)
VPK-099
接纳特别滤膜和离心柱;
操纵工夫约30min,无需超速离心;
ViraBind? Adenovirus Purification Kit
(合用样本量约为4个T75瓶播种的上清)
VPK-100
回收率>90%,纯化结果与CsCl办法相称


4. 病毒滴度检测试剂盒
准确测定重组病毒滴度是提高下流尝试可控性,重复性和准确性的前提,西美杰代办署理的Cell Biolabs品牌针对差别病毒载体的特性别离设想的了多种滴度测定试剂盒,而且兼容了高效和准确的测定办法。

重组病毒范例
品名
货号
特性
慢病毒
(Lentivirus)
Lentivirus Rapid Quantitation Kit
VPK-112
快速定量,操作过程45-60min;
荧光法检测病毒核酸浓度定量病毒滴度,纯化前或纯化后样品都可检测;
灵敏度:1010个病毒粒子/mL或100ul纯化前上清
Lentivirus-Associated p24 ELISA Kit
VPK-107
专利Pull-down手艺别离出病毒相干P24卵白,去除游离P24卵白;
ELISA办法准确定量有活性的重组慢病毒滴度,制止传统办法检测总P24卵白招致的偏差
Traditional p24 ELISA Kit
VPK-108-H
ELISA办法检测总P24卵白定量慢病毒滴度
逆转录病毒
(Retrovirus)
QuickTiter? Retrovirus Quantitation Kit
VPK-120
快速定量,操作过程45-60min;
荧光法检测病毒核酸浓度定量病毒滴度,纯化前或纯化后样品都可检测;
灵敏度:1.5×109个病毒粒子/mL或100ul纯化前上清
腺相干病毒
(AAV)
QuickTiter? AAV Quantitation Kit
VPK-145
快速定量,操作过程<2h;
荧光法检测病毒核酸浓度定量病毒滴度;
灵敏度:纯化前AAV可达109 GC/mL,关于纯化后AAV可达5×1010 GC/mL
腺病毒
(ADV)
QuickTiter? Adenovirus Quantitation Kit
VPK-106
快速定量,操作过程45-60min;
荧光法检测病毒核酸浓度定量病毒滴度,纯化前或纯化后样品都可检测;
灵敏度:1010个病毒粒子/mL或100ul纯化前上清
QuickTiter? Adenovirus Titer Immunoassay Kit
VPK-109
无需空斑构成尝试,制止庞大的铺琼脂步调,操纵更烦琐;
传统办法10天赋可完成的尝试,用该试剂盒仅需2.5天,有ELISA和ICC两种办法供挑选;
QuickTiter? Adenovirus Titer ELISA Kit
VPK-110
可用于所有41个血清型的腺病毒



5. 病毒感染加强试剂

西美杰代办署理的Cell Biolabs品牌还针对差别病毒载体研发了公用促病毒感染试剂,能明显提高病毒对靶细胞的传染,进而提高基因表达服从。

品名
货号
规格
特性
ViraDuctin? Lentivirus Transduction Kit
LTV-200
40 次
复合型试剂能与慢病毒或逆转率病毒构成复合物,与Polybrene?比拟病毒感染服从可提高2-6倍,适用于原代细胞和干细胞
LTV-201
200次
ViraDuctin? Retrovirus Transduction Kit
RV-200
40次
RV-201
200次
ViraDuctin? AAV Transduction Kit
AAV-200
10次
有用提高重组AAV在多种细胞内的转染服从,包罗传统办法转导服从低的细胞和非团结细胞,如原代细胞和干细胞。该试剂使用方便,仅需2h,是AAV转染非团结细胞的首选。
AAV-201
50次
ViraDuctin? Adenovirus Transduction Reagent
AD-200
10次
该试剂让重组腺病毒感染不依赖于细胞的CAR(柯萨奇病毒-腺病毒受体)程度,可明显提高病毒感染低CAR或无CAR表达的细胞,如原代细胞或干细胞,还可提高转入基因的表达服从
AD-201
50次


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